白花蛇舌草的质量研究

【摘要】 目的 建立白花蛇舌草质量控制方法。方法 采用生药学方法对白花蛇舌草及其伪品水线草和纤花耳草进行鉴别，并建立了白花蛇舌草中齐墩果酸的薄层扫描含量测定方法。结果 白花蛇舌草中的齐墩果酸在0.8～6.4μg间有良好的线性关系，回收率为98.7%，RSD为1.95%（n=5）。结论 将生药学研究方法和白花蛇舌草中的齐墩果酸的含量测定方法相结合，可作为质量控制方法。

关键词 白花蛇舌草 水线草 纤花耳草 齐墩果酸 鉴别

【Abstract】 Objective To establish the method of quality control of Oldenlandia Diffusa（willd.）Roxb.Methods The content of oleanolic acid in Oldenlandia Diffusa（willd.）Roxb was determined by TLC-scanning to discriminate its counterfeit such as Oldenlandia corymbosa L.and Hedyotis tenelliflora BL.Results The relationship between Oldenlandia Diffusa（willd.）Roxb and its oleanolic acid content during0.8and6.4μgwas very linear when the recovery rate of adding sample was98.7%，the RSD=1.95%（n=5）.Conclusion Combination of pharmacog-nosy researching method and quantitative determination of Oleanolic acid can be used for the quality control of Olden-landia Diffusa（willd.）Roxb.

Key words Oldenlandia Diffusa（willd.）Roxb Oldenlandia corymbosa L. Hedyotis tenellifolra oleano-lic acid discrimination

白花蛇舌草为茜草科植物白花蛇舌草[Oldenlandia Dif-fusa（Willd）Roxb]的干燥全草，为常用中药，具有清热解毒、利尿消肿、活血止痛之功效，广泛分布于亚热带地区。近年来由于临床上应用广泛，商品供不应求，导致白花蛇舌草异常混乱。常见的混伪品有水线草[（茜草科）Hedyotis corym-bosa（L）Lam的全草]和纤花耳草[（茜草科）Hedyotis teneliflora B1.的全草]。为保证临床用药安全有效，我们对白花蛇舌草进行生药研究，并将常见的混伪品进行鉴别，同时，还建立了白花蛇舌草中齐墩果酸的薄层扫描含量测定方法。现将研究结果报告如下。

1 仪器与试药

薄层扫描仪（日本岛津CS-930型）;硅胶G预制板（德国Merck公司）定量毛细管（美国Drummand公司生产）;齐墩果酸对照品（中国药品生物制品定所）;白花蛇舌草、水线草和纤花耳草均采自药圃并经鉴定。所用试剂均为分析纯。

2 生物学研究

2.1 植物形态 白花蛇舌草为一年生披散小草本，茎扁圆柱形，从基部分枝。单叶对生、膜质、线形，长1～3cm，宽1～3mm，顶端急尖，侧脉不明显，无柄，托叶合生，长1～2mm，上部芒尖，花四数，单生或成对生于叶腋，花梗长0.1～1.5cm，萼管与子房合生，球形，略扁、宿存;花冠白色，筒状，长3.5～4mm，裂片卵状矩圆形;雄蕊生于花冠筒喉部，花药2室;雄蕊1。蒴果扁球形，直径2～3mm，灰褐色。水线草的花2～5朵集成腋生伞房花序，花梗极纤细，长0.5～1cm;托叶合生成鞘状，顶端近截形，有刚毛。纤花耳草的叶革质，花无柄，1～3朵生于叶腋内，而植株干后黑色。

2.2 药材性状 白花蛇舌草全体扭曲成团状，灰绿色或灰棕色，有主根一条，须根纤细。茎细而卷，多分枝，扁圆柱形，质脆易折断，中央有白色髓部。叶对生，条形，长1～3cm，多破碎脱落。蒴果扁球形，腋生，同含多数极细小种子。气微，味淡。水线草的茎四棱形，多中空，叶为条形或条状披针形，蒴果2～5个腋生，具长梗。纤花耳草的叶革质，反卷，蒴果卵形，腋生，几无梗，味淡有烧舌感。

2.3 显微特征 白花蛇舌草:（1）表皮细胞一列，类方形或卵圆形，常见单个细胞向外强烈突起，外被角质层。（2）皮层较窄，细胞一般比表皮细胞小，含少量小油滴，个别细胞中含草酸钙针晶束;内皮层细胞一列，切向扁长。（3）韧皮部狭窄，约2～5列细胞。（4）木质部呈环，导管常2～6个径向单列，木纤维壁厚，木化;射线细胞一列。（5）髓部宽阔，细胞较大，可见草酸钙针晶。

3 白花蛇舌草中齐墩果酸的含量测定

3.1 溶液备制

3.1.1 对照品溶液 精密称取齐墩果酸对照品8.0mg于5ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，即得。

3.1.2 药材供试液 取过40目筛的干燥的白花蛇舌草药材粉末0.2g，精密称定，加硫酸-乙醇（1∶9）50ml，回流3h，待冷却后，加氯仿50ml，再回流2h，冷却，过滤。药渣用20ml氯仿洗涤，洗涤液与滤液合并。分取氯仿层、水层，分别用10ml氯仿萃取3次，合并氯仿液。氯仿液用40ml水洗涤，分取氯仿层，置水浴上蒸干。残渣用氯仿溶解并定溶至2ml，作供试液。

3.2 薄层扫描条件 硅胶G预制薄层板，展开剂为氯仿-甲醇（9∶1），上行展开后，取出，晾干，喷10%硫酸乙醇溶液，105℃烘3min，取出，在薄层板上覆盖一同样大小的洁净玻璃板，四周用胶带封牢，扫描测定。扫描条件:反射式双波长锯齿扫描，测定波长为λ S =530nm，λ R =420nm，狭缝0.4mm×0.4mm，SX=3。

3.3 线性范围 精密吸取上述齐墩果酸对照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，按上述条件展开、显色、扫描，得回归方程Y=3565X-1779，r=0.9996，线性范围内0.8～6.4μg。

3.4 精密度试验 精密吸取齐墩果酸对照品溶液2.0μl，共5份，分别点于同一硅胶G薄层板上，按上述条件展开、显色、扫描，测得峰面积积分值的RSD=1.66%（n=5）。

3.5 稳定性试验 取对照品溶液点样，按上述条件展开显色后，在0、0.5、1、1.5、2、2.5、3h，分别进行扫描测定，结果峰面积积分值的RSD为0.57%，显示在3h内稳定。

3.6 重现性试验 精密称取同一批号样品5份，按3.7项下操作，测得样品齐墩果酸的RSD=1.8%（n=5）。

3.7 样品测定 分别精密吸取药材供试液2.0μl，对照品溶液1.0μl和3.0μl，交叉点于同一硅胶G薄层板上，按上述条件展开、显色、扫描测定，以外标二点法计算含量。结果见表1。

3.8 回收试验 按加样回收法制备试样并按3.7项下操作，结果回收率为98.7%，RSD为19.5%（n=5）。

表1 几批白花蛇舌草的齐墩果酸含量（略）

4 讨论

白花蛇舌草与上述几种伪品其药材外观极相似，引起产地错收错销，应予纠正。其次我省部分地区历来就有将水线草与白花蛇舌草相互混用习惯，经查资料表明，白花蛇舌草主含齐墩果酸、熊果酸等，水线草主含东叶草苷、鸡屎藤次苷。笔者认为水线草不能作白花蛇舌草药用。

（编辑小 南）

作者单位:514011广东省梅州中医院

514021广东省梅州市药品检验所