p63蛋白在乳腺病变中的表达及意义

【摘要】 目的 探讨p63蛋白在乳腺疾病诊断以及鉴别诊断中的应用价值并与其他基底细胞标记物进行比较。方法 对40例不同类型的乳腺病变分别进行p63、SMA、S-100蛋白、34βE12免疫标记。结果 p63蛋白在乳腺良性病变腺体肌上皮细胞核有阳性表达，围绕在腺体周围，原位癌癌巢周围肌上皮细胞数目减少，呈间断性分布，浸润性癌癌巢周围肌上皮细胞大部分消失或无肌上皮细胞分布，且阳性表达强度与肿瘤分化程度相关。其他基底细胞标记物也可以比较特异地显示乳腺腺体周围肌上皮，但存在一定的非特异性着色。结论 从乳腺正常组织、良性病变、原位癌、早期浸润和浸润性癌，腺体周围的肌上皮细胞是一个逐渐消失的过程，p63蛋白免疫组化标记可以比较特异地反映这个过程，而且受其他影响因素小。

The significance of expression of p63in breast lesions

Zhao Jianhua

Department of Pathology，The Affiliated Nanjing First Hospital of Nanjing Medical University，Nanjing210006.

【Abstract】 Objective To explore the significance of expression of p63protein in the diagnosis and differenˉtial diagnosis of breast diseases，and to compare the property of other markers of basal cell.Methods S-P labeling technique was used to study expression of p63protein，S-100protein，SMA，34βE12in10cases of normal breast tissue and40cases of different type of breast lesions.Results In normal breast tissue and benign lesions，myoepitheˉlial cell nuclei showed brown，and produced an appearance of brown“basal rim”，myoepithelial layer was mostly or totally absent in early-invasive and invasive carcinomas of the breast.Other markers of myoepithelial cell showed difˉferent pattern of positive expression with some non-special labelling.Conclusion Disappearance of myoepithelial cells represents progressive transformation of normal and benign lesions to carcinoma in situ，early invasive carcinoma and invasive carcinomas of the breast，p63immunolabelling is a useful marker in the diagnosis of breast diseases.

Key words breast diseases immunohistochemistry p63

在乳腺疾病中，肌上皮细胞构成正常乳腺上皮结构的基底细胞层。在乳腺良性病变中，腺体周围肌上皮存在，而在恶性病变出现浸润时肌上皮层消失，因此，乳腺肌上皮细胞是否存在对乳腺癌的诊断及鉴别诊断具有重要的价值[1～3]。以往乳腺肌上皮细胞的确定多数应用肌上皮细胞特异性标记物，如S-100、SMA、34βE12等，本研究应用乳腺肌上皮细胞选择性细胞核标记物p63蛋白进行标记，并与其他标记物进行比较，探讨肌上皮细胞标记物在乳腺病变中的诊断意义及各种肌上皮标记物的优劣。

1 材料与方法

1.1 材料 收集2003年本院外科手术送检各类乳腺病变40例，分组见表1，取其中10例乳腺病变周围组织为正常对照组。

1.2 方法 所有组织经10%中性福尔马林液固定，常规脱水，石蜡包埋，厚4μm连续切片。所有病例均分别作HE染色及免疫组织化学染色，免疫组化染色方法为S-P法。

1.3 试剂 p63、SMA、34βE12、S-100单克隆抗体均购自Dako公司。抗原修复液Ⅱ购于福州迈新生物技术公司。

表1 病例分组（略）

2 结果

乳腺肌上皮细胞核p63阳性表达，呈棕色颗粒状。正常乳腺组织、乳腺腺病、纤维腺瘤、叶状肿瘤等乳腺良性病变的腺体周围可见连续性棕色串珠状的细胞核环绕;在导管原位癌、小叶原位癌癌巢周围肌上皮细胞数目减少呈棕色连续或不连续围绕;而在乳腺浸润性癌腺体周围则没有阳性细胞出现，包括浸润性导管癌、浸润性小管癌等。乳腺组织中血管内皮细胞和间质肌纤维母细胞p63均阴性表达。比较肌上皮阳性表达的强度，可以看到在正常乳腺腺体周围的肌上皮细胞着色深，呈棕黑色，而肿瘤性腺体周围的肌上皮着色较浅。

34βE12在乳腺腺体肌上皮细胞胞质阳性表达，部分腺上皮细胞胞质也有着色，有的病例主要是腺上皮细胞质着色。SMA显示乳腺肌上皮细胞胞质着色，同时乳腺间质血管也明确表达，后者呈管状，容易与阳性腺体混淆。

S-100蛋白显示乳腺腺体的肌上皮细胞胞质着色，但不是很完整，部分肿瘤腺上皮也有表达，间质中的神经纤维有着色。

3 讨论

乳腺腺体肌上皮细胞位于腺泡上皮与基膜之间。组织学上，正常乳腺导管上皮和良性病变的乳腺导管上皮由腺腔侧的腺上皮和间质侧的肌上皮共同组成双层结构。当导管上皮发生癌变时，其外周的肌上皮萎缩或消失，特别是有浸润时，其外围肌上皮缺失。在乳腺上皮增生时，常常引起腺体终末小叶单位结构和细胞成份发生改变，特别是在一些构象复杂的乳腺上皮性病变中，如导管内乳头状瘤、腺肌上皮瘤、异型小叶、硬化性腺病等，腺体周围的肌上皮常常很难辨认，容易与恶性病变混淆[3～6]。因此，在病理诊断过程中，经常需要用特异的肌上皮标记物显示乳腺病变肌上皮的存在与否，这些标记物中目前最常用的有:高分子细胞角蛋白（CK/34βE12）、S-100蛋白、平滑肌特异性肌球蛋白（smooth muscle myosin）、平滑肌肌动蛋白（smooth muscle actin）、肌动蛋白结合蛋白和平滑肌肌球蛋白重链（SMM-HC）[1，2，5，7]。本研究结果显示，上述的基膜标记物中，高分子细胞角蛋白可以显示肌上皮细胞，但部分腺上皮也表达，甚至可以是腺上皮表达为主，在这些病例中判断肌上皮分布比较困难。S-100蛋白对肌上皮特异性和敏感性较差，文献也报道S-100蛋白在多数乳腺癌的上皮也有表达，同时间质中的神经纤维也表达，而且，S-100蛋白的免疫染色结果很不稳定，目前对染色结果的判断上还存在争议，因此，多数文献认为S-100蛋白作为乳腺基底细胞的标记物不是太适合。而其余的标记物多为平滑肌源性标记物，因此，乳腺间质的肌纤维细胞、血管平滑肌、叶状肿瘤腺体周围的一些间质成分等都有表达，易造成判别上的混淆。

p63基因是新近认识的p53基因家族的一员，定位于3q27-3q29，其结合域与p53基因有高度的同源性，在正常乳腺肌上皮、乳腺良性病变腺体周围的肌上皮、导管原位癌和小叶原位癌的癌巢周围的肌上皮、腺肌上皮细胞瘤及腺样囊性癌的细胞核中表达[1，6，8～10]。研究表明正常和病理的乳腺腺体肌上皮均表达p63，而且p63免疫活性表达通常限于肌上皮前驱细胞，观察p63表达有助于观察静止的乳 腺的肌上皮前驱细胞，这一点对乳腺临床病理非常有价值，同样对其他需要通过判断基底细胞分布方式来确定性质的肿瘤，如唾液腺肿瘤、皮肤肿瘤，都有同样的意义。

本组乳腺组织p63免疫标记显示，p63标记能准确地显示肌上皮细胞核，而不显示其他细胞成份。因此，在正常乳腺组织腺体及乳腺良性病变腺体周围，显示肌上皮连续性围绕;而在导管原位癌、小叶原位癌癌巢周围，肌上皮数目减少呈间断或不连续环状;而乳腺早期浸润性导管癌和乳腺浸润性癌癌巢周围，可见肌上皮部分消失及肌上皮全部消失，与文献报道一致[5]。由此表明从正常乳腺腺体、良性腺体到原位癌、早期浸润和浸润性癌性腺体，肌上皮的减少、消失是一逐渐发展的过程。同时，本研究还观察到，p63蛋白表达的强度在正常腺体周围肌上皮最强，良性肿瘤次之，恶性肿瘤最弱，提示p63蛋白表达可能与肿瘤的良恶性相关。本组研究还显示，p63蛋白的抗原性比较强，不同组织、新旧蜡块都能有满意的表达，结果比较稳定、可靠。

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作者单位:210006南京医科大学附属南京第一医院病理科